本制品是采用SYBR Green I 嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。制品中含有Real Time PCR反应的最适浓度SYBR Green I,是一种2×浓度的Premix Type试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单。
本制品通过添加辅助蛋白和对Buffer组份的改良,使反应特异性比SYBR Premix Ex Taq II (Code No. RR820)更高。特别对影响SYBR Green分析方法的主要因素的引物二聚体的产生有明显抑制作用。本制品建议使用3 Step PCR作为标准流程,3 Step PCR反应时间稍长,但能有效抑制非特异性的PCR扩增。
本制品对微量模板浓度也有很高的灵敏度,可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对靶基因进行准确定量检测,重复性好,可信度高。
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■ 保存 |
4℃保存6个月。
避光保存,避免污染。
干冰运输,到货后4℃避光保存,使用前要充分混匀。
长期保存请置于-80℃,勿存于-20℃。产品融解后请于4℃保存并在6个月内用完。
注意:将本酶放置于-20℃的冰箱可能会导致酶活性降低。因为有的冰箱并不能严格的控制温度在
-20℃,导致SYBR® Premix DimerEraser可能会冻结不完全。稳定的保存方式是使用前于-80℃放置,融解后于4℃保存。
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■ 试剂盒特长 |
1. 适用于Real Time PCR反应,可以快速、准确地对目的基因进行检测、定量。
2. 在2×浓度的Premix中,预先混有SYBR Green I,PCR反应液配制时,只需加入模板、引物、灭菌蒸馏水便可进行Real Time PCR反应,操作简单方便。
3. DNA聚合酶使用了TaKaRa Ex Taq HS,可以进行Hot Start法PCR反应,有效防止热循环反应前由引物非特异性退火引起的非特异性扩增。同时制品中还添加了辅助蛋白,可以进一步抑制PCR反应中由于引物的非特异性退火或引物二聚体等引起的非特异性扩增。
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■ 使用注意 |
1. 使用时请上下颠倒轻轻均匀混合,避免产生气泡,防止因混合不均匀造成的反应不足。
a) 请勿涡旋振荡混匀。
b) SYBR Premix DimerEraser (2×conc.) 在-80℃存放可能会产生白色或淡黄色的沉淀,可用手掌温度缓慢溶解于室温避光放置,轻柔的上下颠倒混匀直至沉淀全部消失。
c) 沉淀会导致溶液成分不均一,使用前务必充分混匀试剂。
2. 请于冰上配制反应试剂。
3. 本制品中含有荧光染料SYBR Green I,保存制品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
4. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等,尽量避免污染。 |